Phetisetso ea matla a fluorescence resonance (FRET)
Fluorescence resonance energy transfer (FRET) ke ts'ebetso ea phetisetso ea matla e se nang mahlaseli ao mofani a fanang ka matla a mmuso a fetisetsoang ho ea amohelang boemo ba thabo ka ho sebelisana le banyalani ba motlakase ba intermolecular.Ts'ebetso ena ha e akarelletse li-photon mme ka hona ha e na mahlaseli.Tlhahlobo ena e na le melemo ea ho potlaka, ho nahanela le ho ba bonolo.
Dae e sebelisitsoeng tekong ea FRET e ka tšoana.Empa lits'ebetsong tse ngata, ho sebelisoa lidae tse fapaneng.Ka bokhutšoanyane, ho fetisoa ha matla a khanyang a resonance ke ho fetisoa ha li-dipoles tse peli ho tloha ho mofani (dae 1) ho ea amohelang (dae 2) ha sehlopha sa bafani se thabile.Ka kakaretso, sekhahla sa tlhahiso ea sehlopha sa Donor fluorophore se fetana le sekhahla sa ho monya sa sehlopha sa Acceptor."Ha sebaka se pakeng tsa li-fluorophore tse peli se loketse (10 - 100 A), phetisetso ea matla a fluorophore ho tloha ho mofani ho ea ho moamoheli e ka bonoa."Mokhoa oa phetisetso ea matla o ipapisitse le sebopeho sa lik'hemik'hale sa receptor:
1. E fetoloa ho sisinyeha ha limolek'hule, ke hore, leseli le khanyang la ho fetisa matla lea nyamela.(Moamoheli ke setima-mabone)
2. Mokelikeli ona o matla ho feta moamoheli ka booona, e leng ho fellang ka ho feto-fetoha ha mabone a manyenyane a fluorescence.”(Li-receptors ke li-emitter tse khanyang).
Sehlopha sa bafani (EDANS) le liphatsa tsa lefutso tse amohelang (DABCYL) li hokahane ka mokhoa o ts'oanang le substrate ea tlhaho ea HIV protease, 'me ha substrate e sa khaotsoe, DABCYL e ka tima EDANS ebe e fetoha e sa bonahaleng ho fluorine.Ha ho khaoha ha HIV-1 protease, EDANS ha e sa tima ke DABCYL, 'me EDANS luciferase e ka fumanoa hamorao.Ho fumaneha ha li-protease inhibitors ho ka hlahlojoa ka liphetoho tsa matla a fluorescence a EDANS.
Li-peptide tsa FRET ke lisebelisoa tse bonolo tsa ho ithuta ho se khetholle ha peptidase.Kaha ts'ebetso ea eona e ka beoa leihlo khafetsa, e fana ka mokhoa o bonolo oa ho lemoha tšebetso ea enzyme.Sheen e hlahisitsoeng kamora hydrolysis ea litlamo tsa peptide ke mofani / moamoheli e fana ka tekanyo ea ts'ebetso ea enzyme maemong a nanomolar.Ha peptide ea FRET e ntse e tsitsitse, e bontša ho nyamela ka tšohanyetso ha khanya ea ka hare, empa ha tlamo leha e le efe ea peptide e khahlanong le mofani / ea amohelang e robeha, e ntša flash, e ka fumanoang ka ho tsoelang pele 'me mosebetsi oa enzyme o ka lekanyetsoa.
Nako ea poso: Aug-14-2023